Трошин Алексей Андреевич
аспирант
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина»,
Автономная некоммерческая организация «Ветеринарная фармацевтика»
Аннотация: изучена чувствительность возбудителя эшерихиоза к антимикробным средствам, для контроля эшерихиоза разработана лекарственных жидкая лекарственная форма цефтиофура гидрохлорида; препарат цефанекс 50, 100 и 200 является раствором для инъекций с содержанием действующего вещества в количестве 50, 100 и 200 мг/мл.
Ключевые слова: телята, эшерихиоз, антибиотик, цефтиофура гидрохлорид.
THE CEFANEX DRUG DEVELOPMENT FOR CALVES ECHERICHIOSIS TREATMENT
Troshin Aleksei Andreevich
Summary: the sensitivity of the pathogen agent of Escherichiosis to antibacterial drugs has been studied and for the Escherichiosis control the liquid dosage form of ceftiofur hydrochloride has been developed; The Cefanex 50, 100 and 200 drug has a liquid injection dosage form equivalent to 50, 100 and 200 mg/ml active substance.
Key words: calves, Escherichiosis, antibiotic, ceftiofur hydrochloride.
Государственное регулирование и частная инициатива в области разработки новых лекарственных средств для животных направлены на смену депрессивного сценария и переход на инновационную модель развития фармацевтической промышленности Российской Федерации и ветеринарной фармации в частности. Уровень подготовки специалистов, материальная и сырьевая база в состоянии на 70 и более процентов обеспечить внутренние потребности в лекарственных средствах для животных [1, с. 21]. Совершенствование контроля эшерихиозов у животных, в том числе разработка и использование лекарственных средств с антимикробной активностью для его профилактики и лечения, является предметом исследований и темой научных работ отечественных и зарубежных институтов и исследователей [2, с. 37].
В 2016 – 2020 гг. в Научно-производственном внедренческом предприятии «Ветфарм», г. Тимашевск и на кафедре микробиологии, эпизоотологии и вирусологии факультета ветеринарной медицины ФБГОУ ВО «Кубанский государственный аграрный университет имени И. Т. Трубилина», г. Краснодар, провели выделение и идентификацию возбудителя болезни. Бактериологическое исследование проводили руководствуясь Методическими указаниям по бактериологической диагностике эшерихиоза (эшерихиоза) животных [3, с. 17]. От больных телят чаще всего выделяли возбудитель E. сoli, патогенный штамм серовар К99.
Чувствительность выделенного возбудителя болезни Escherichia coli К99 изучали диско-диффузным методом согласно действующим методическим указаниям МУК 4.2.1890-04. Метод основан на диффузии антимикробных веществ из пропитанных ими дисков в плотную питательную среду и задержку роста предварительно посеянной микрофлоры. Использовали диски с наиболее распространенными, доступными и зарегистрированными для ветеринарного применения антимикробными средствами. Содержание действующего вещества в диске составляло как правило 30 мкг (за исключением: амоксициллина 25; гентамицина, норфлоксацина 10; левофлоксацина, ципрофлоксацина 5 мкг действующего вещества на 1 диск) [4, с. 306].
Для приготовления инокулята выделенного возбудителя эшерихиоза брали 5 колоний, выросших в течении 19 часов на агаре, суспендировали их с физраствором до достижения показателя 0,5 по стандарту мутности Мак Фарланда, соответствующего количеству микроорганизмов 1,5 х 108 КОЕ/мл. Наносили инокулят стерильным ватным тампоном, равномерно, в трех направлениях. Просушили 3 – 5 минут при комнатной температуре и нанесли по 4 – 5 диагностических диска на поверхность агара в 100 мм чашку Петри. Инкубировали 20 часов при температуре 35° С, перевернутыми вверх дном. Результаты учитывали в том же положении, в отраженном на 45 градусов свете лампы, на матовой поверхности, штангенциркулем. Результаты изучения чувствительности представлены в таблице 1.
Данные таблицы 1 предназначены для обоснования лечения отдельного животного, прогноза для контроля этой нозоологической единицы в хозяйстве, выявления устойчивых штаммов и выявление экономически целесообразных лекарственных средств. Установлена чувствительность выделенного возбудителя к флорфениколу, энрофлоксацину и цефтиофуру. Следует отметить, что эти средства являются относительно новыми для практической ветеринарии (за исключением энрофлоксацина).
Проанализировав «Перечень ветеринарных лекарственных средств (фармакологически активных веществ), максимально допустимые уровни остатков которых могут содержаться в не переработанной пищевой продукции животного происхождения», утвержденный Решением Коллегии Евразийской экономической комиссии от 13 февраля 2018 г. № 28 [5, с. 1], определили средства с наибольшими допустимыми остаточными количествами [6, с. 13]. В их число мы отобрали цефтиофура гидрохлорид с допустимым остаточным количеством в мясе 1 мг/кг. У цефтиофура гидрохлорида при инъекционном введении животным эффективная доза приближается к допустимой.
Учитывая изложенное [7, с. 445] и по заявке научно-производственного предприятия «Ветфарм» (2017-2020) разработали препараты Цефанекс 50, 100 и 200. Использовали субстанцию, содержащую 99,8 % цефтиофура гидрохлорида и полимерный растворитель.
Таблица 1
Чувствительность Escherichia coli К99 к антимикробным средствам
№ п/п | Лекарственные средства | Зоны задержки роста микроорганизмов (мм) * | Критерии интерпретации результатов определения чувствительности для Enterobacteriaceae, для чувствительных культур мм |
Escherichia coli К99 | |||
1 | Амоксициллин | 16 | ≥21 |
2 | Гентамицин | 13 | ≥15 |
3 | Доксициклин | 16 | ≥16 |
4 | Левофлоксацин | 17 | ≥17 |
5 | Линкомицин | 10 | ≥20 |
6 | Тетрациклин | 12 | ≥19 |
7 | Тиамулин | 19 | ≥20 |
8 | Тилмикозин | 20 | ≥20 |
9 | Тилозин | 16 | ≥20 |
10 | Энрофлоксацин | 22 | ≥20 |
11 | Флорфеникол | 20 | ≥18 |
12 | Цефтиофур | 25 | ≥20 |
13 | Ципрофлоксацин | 21 | ≥21 |
Цефанекс изготовили массо-объемным методом. Расфасовали в стеклянные флаконы в асептических условиях. Готовый препарат контролировали биопробой на лабораторных животных на безвредность. Подлинность и активность препарата определяли фармакопеейными методами.
Выводы. На основе изучения чувствительности возбудителя эшерихиоза у телят, для его профилактики и лечения, разработана лекарственная форма для инъекций, содержащая 50, 100 и 200 мг/мл цефтиофура гидрохлорида.
Список литературы
1. Антипов В.А. Вопросы развития ветеринарной фармации / В. А. Антипов, А.Н. Трошин // Ветеринария Кубани. – 2010. – №6. – С. 21-22.
2. Шевченко А. А. Курс лекций по дисциплине ветеринарная микробиология. / А. А. Шевченко, Н. Н. Гугушвили. – Краснодар: КУБГАУ, 2014. – С. 37 – 40.
3. МУК 13. – 7 –2/2117. Методические указания по бактериологической диагностике эшерихиоза (эшерихиоза) животных. – М.: Минсельхоз России. Департамент ветеринарии. – 2000. – 17 с.
4. МУК 4.2.1890-04 Методические указания. Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам. Клин. микробиол. антимикроб. химиотер. М. – 2004. – № 6 (4). – С. 306 – 359.
5. «Перечень ветеринарных лекарственных средств (фармакологически активных веществ), максимально допустимые уровни остатков которых могут содержаться в не переработанной пищевой продукции животного происхождения», утвержденный Решением Коллегии Евразийской экономической комиссии от 13 февраля 2018 г. № 28. [Электронный ресурс]. – Режим доступа: http://www.eurasiancommission.org/, свободный. – Загл. с экрана.
6. Трошин А.Н. Нормативно-правовое регулирование ветеринарной фармации / А.Н. Трошин, В.А. Антипов // Методическое пособие по дисциплине специализации по фармации “Управление и экономика фармации” / Краснодар, 2012. 60 с.
7. Антипов В.А. Изготовление лекарственных препаратов в ветеринарии
/ В. А. Антипов, А.Н. Трошин // Сборник научных трудов Ставропольского научно-исследовательского института животноводства и кормопроизводства. 2014. Т. 3. № 7. С. 445-449.
© А.А.Трошин, 2020